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肉毒碱棕榈酰转移酶(CPT1)测试盒正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义：

肉毒碱棕榈酰转移酶是存在于线粒体内膜的一类?；泼??？赡娴卮呋吁；?/span>将?；浦罫-肉毒碱的反应，在转运脂肪酸通过线粒体内膜的过程中起重要作用。

测定原理：

基于肉碱和脂酰辅酶在丙二酰辅酶存在与否的条件下，通过肉碱脂酰转移酶(CPT-I)的作用，产生脂酰肉碱，并释放出巯基辅酶(COA-SH)，与Ellman试剂DN-TB反应后，产生黄色的TNB。通过其吸收峰值得变化(412nm)，来定量分析CPT-1的活性。

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰、无水乙醇和蒸馏水
样品中AA提?。?/span>

1.按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一）进行室温匀浆，然后转移到1.5 mL EP 管中，盖紧后（防止水分散失）置于沸水浴提取15 min；自来水冷却后，8000g，，4℃离心10min，上清液置冰上待测。

2.细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：试剂一体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL试剂一），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g，4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

3.血清等液体：直接检测。

计算公式如下：

1、血清（浆）LAP活力的计算:

单位的定义：每mL血清（浆）每分钟生成1 nmol的对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP（nmol/min/mL）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷V样÷T=205.8×ΔA

2、组织、细菌或细胞中LAP活力的计算:

（1）按样本蛋白浓度计算：

单位的定义：每mg组织蛋白每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP（nmol/min /mg prot）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷(V样×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr

（2）按样本鲜重计算：

单位的定义：每g组织每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP（nmol/min /g 鲜重）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=205.8×ΔA÷W

（3）按细菌或细胞密度计算：

单位的定义：每1万个细菌或细胞每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP（nmol/min /104 cell）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷(2000×V样÷V样总) ÷T=0.103×ΔA

V反总：反应体系总体积，2×10-4 L；ε：对硝基苯胺摩尔消光系数，9.72×103 L / mol /cm；d：比色皿光径，1cm；V样：加入样本体积，0.05 mL；V样总：加入提取液体积，1 mL；T：反应时间，2 min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；2000：细菌或细胞总数，2000万。

注意事项：

1. 试剂盒中试剂三、试剂四和标准品均需临用前配制，且避光保存，配制好未使用完的4℃保存且3天内使用完毕。

2. 为保证实验结果的准确性，需先取1-2个样做预实验，如果测定的吸光值过高（高于2.5），用蒸馏水稀释后再测定。

3. 与茚三酮反应在570nm处无吸收峰，因此，570nm处测定结果不含这两种氨基酸的量。

4．检出限为100μmol/L。

信号素3GELISA试剂盒 SEMA3G免费代测试剂

信号素3FELISA试剂盒 SEMA3F免费代测试剂

信号素3DELISA试剂盒 SEMA3D免费代测试剂

信号素3BELISA试剂盒 SEMA3B免费代测试剂

信号淋巴细胞激活分子家族成员7ELISA试剂盒 SLAMF7免费代测试剂

信号传导转录激活因子5BELISA试剂盒 STAT5B免费代测试剂

信号传导转录激活因子5AELISA试剂盒 STAT5A免费代测试剂

信号传导转录激活因子2ELISA试剂盒 STAT2免费代测试剂

信号传导转录激活因子1ELISA试剂盒 STAT1免费代测试剂

锌指同源框蛋白4ELISA试剂盒 ZFHX4免费代测试剂

心脏肌球蛋白结合蛋白CELISA试剂盒 MYBPC3免费代测试剂

心磷脂?；泼?/span>1ELISA试剂盒 LCLAT1免费代测试剂

心磷脂合酶ELISA试剂盒 CLS免费代测试剂

心肌型兰尼定受体2ELISA试剂盒 RYR2免费代测试剂

心肌素ELISA试剂盒 MYOCD免费代测试剂
肉毒碱棕榈酰转移酶(CPT1)测试盒淀粉比色法检测试剂盒 可见分光光度法 50管/48样

直链淀粉比色法检测试剂盒 微量法100管/96样

直链淀粉比色法检测试剂盒 可见分光光度法 50管/48样

支链淀粉比色法检测试剂盒 微量法100管/96样

支链淀粉比色法检测试剂盒 可见分光光度法 50管/48样

α比色法检测试剂盒 微量法 100管/48样

α比色法检测试剂盒 可见分光光度法 50管/24样

β比色法检测试剂盒 微量法 100管/48样

β比色法检测试剂盒 可见分光光度法 50管/24样