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线粒体柠檬酸(MCA)含量测试盒

简要描述:

线粒体柠檬酸(MCA)含量测试盒是线粒体三羧酸循环的第一个中间产物,由柠檬酸合酶催化乙酰CoA与草酰乙酸合成,其含量是三羧酸循环强度的主要指标之一。

更新时间:2024-09-02;厂商性质:经销商;览量:853

商品详情:
线粒体柠檬酸(MCA)含量测试盒测定意义:

CA是线粒体三羧酸循环的第一个中间产物,由柠檬酸合酶催化乙酰CoA与草酰乙酸合成,其含量是三羧酸循环强度的主要指标之一。

配合测定酸含量、酸脱氢酶活性、乙酰CoA含量、柠檬酸合酶活性和CA含量,其中(1)酸含量和酸脱氢酶活性变化可以反映糖酵解进行程度,(2)综合分析酸含量、酸脱氢酶活性和乙酰CoA含量变化可以反映脂肪酸β-氧化途径提供的乙酰CoA情况,(3)乙酰CoA含量、柠檬酸合酶活性和CA含量变化可以反映三羧酸循环进行状况。

货号

规格

检测方法

YSH3487

100管/96样

微量法

YSH3487-1

50管/48样

紫外分光光度法

YSH3487-1

25管/24样

紫外分光光度法


测定原理:

CA在柠檬酸裂解酶的作用下,生成α-酮酸(草酰乙酸);在弱酸性条件下,α-酮酸进一步与苯肼反应,生成相应的α-酮酸苯腙;α-酮酸苯腙在330nm处有吸收峰,该波长下吸光度的变化程度可反映出CA的含量。

自备仪器和用品:

可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、可调式移液枪、微量石英比色皿/96孔板、研钵、蒸馏水。
样品中AA提?。?/span>

1.按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行室温匀浆,然后转移到1.5 mL EP 管中,盖紧后(防止水分散失)置于沸水浴提取15 min;自来水冷却后,8000g,,4℃离心10min,上清液置冰上待测。

2.细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL试剂一),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g,4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

3.血清等液体:直接检测。

计算公式如下:

1、血清(浆)LAP活力的计算:

单位的定义:每mL血清(浆)每分钟生成1 nmol的对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP(nmol/min/mL)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷V样÷T=205.8×ΔA

2、组织、细菌或细胞中LAP活力的计算:

1)按样本蛋白浓度计算:

单位的定义:每mg组织蛋白每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr

2)按样本鲜重计算:

单位的定义:每g组织每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP(nmol/min /g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=205.8×ΔA÷W

3)按细菌或细胞密度计算:

单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAP(nmol/min /104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(2000×V样÷V样总) ÷T=0.103×ΔA

V反总:反应体系总体积,2×10-4 L;ε:对硝基苯胺摩尔消光系数,9.72×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.05 mL;V样总:加入提取液体积,1 mL;T:反应时间,2 min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g;2000:细菌或细胞总数,2000万。

注意事项:

1. 试剂盒中试剂三、试剂四和标准品均需临用前配制,且避光保存,配制好未使用完的4℃保存且3天内使用完毕。

2. 为保证实验结果的准确性,需先取1-2个样做预实验,如果测定的吸光值过高(高于2.5),用蒸馏水稀释后再测定。

3. 与茚三酮反应在570nm处无吸收峰,因此,570nm处测定结果不含这两种氨基酸的量。

4.检出限为100μmol/L。

核糖核酶A12ELISA试剂盒 RNASE12免费代测试剂

核糖核酶A11ELISA试剂盒 RNASE11免费代测试剂

核糖核酶A10ELISA试剂盒 RNASE10免费代测试剂

核糖核酶ⅢELISA试剂盒 RNASEN免费代测试剂

核外切酶1ELISA试剂盒 EXO1免费代测试剂

核受体相关蛋白1ELISA试剂盒 NURR1免费代测试剂

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核仁磷蛋白2ELISA试剂盒 NPM2免费代测试剂

核仁蛋白9ELISA试剂盒 NOL9免费代测试剂

核仁蛋白8ELISA试剂盒 NOL8免费代测试剂

核仁蛋白7ELISA试剂盒 NOL7免费代测试剂

核仁蛋白6ELISA试剂盒 NOL6免费代测试剂

核仁蛋白58ELISA试剂盒 NOP58免费代测试剂

核仁蛋白4ELISA试剂盒 NOL4免费代测试剂

核仁蛋白3ELISA试剂盒 NOL3免费代测试剂
线粒体柠檬酸(MCA)含量测试盒肉毒碱棕榈酰转移酶(CPT1)测试盒/分光光度法50管/48样

肉毒碱棕榈酰转移酶(CPT1)测试盒/微量法100管/96样

肉桂醇脱氢酶(CAD)测试盒/分光光度法50管/48样

肉桂醇脱氢酶(CAD)测试盒/微量法100管/96样

肉桂-4-羟化酶(C4H)测试盒/分光光度法50管/48样

肉桂-4-羟化酶(C4H)测试盒/微量法100管/96样

(LD)测试盒(测全血)/比色法50管/48样

(LD)测试盒(测血清、组织)/比色法50管/48样

乳含量(LA)测试盒/分光光度法50管/24样


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